透析是生物化學實驗室簡便常用的分離純化技術之一
更新時間:2021-04-22 點擊次數:870次
透析是生物化學實驗室簡便常用的分離純化技術之一。在生物大分子的制備過程中,除鹽、除少量有機溶劑、除去生物小分子雜質和濃縮樣品等都要用到透析的技術。
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內,將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內,而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外,直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
正確選擇合適的截留分子量
截留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質分子量的比率至少為25.
選擇截留分子量的經驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。
正確選擇扁平寬度
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋
透析袋的化學相容性
化學相容性主要用作使用指導,不作為化學相容的保證。溫度,濃度,長時間曝光等因素的改變可能影響產品的使用。建議您自設條件進行測試。